大肠杆菌质粒-大肠杆菌质粒提取实验报告

摘要： 本文目录一览：1、大肠杆菌里面有质粒吗?2、大肠杆菌中的质粒能表达吗...

本文目录一览：

• 1、大肠杆菌里面有质粒吗?
• 2、大肠杆菌中的质粒能表达吗
• 3、大肠杆菌的质粒与酵母菌的质粒
• 4、什么是大肠杆菌质粒载体?

大肠杆菌里面有质粒吗?

1、大肠杆菌中存在质粒不一定都具有抗性基因，但有抗性的大肠杆菌一般都与其具有质粒有关。

2、大肠杆菌质粒DNA是与组蛋白2a、2b、5形成的八聚体结合。质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，是细胞染色体外能够自主***的很小的环状DNA分子。

3、大肠杆菌正是因为其具备有质粒，且已表达，所以才是现在最重要的基因工程菌。另外更专业的说不能称大肠杆菌，而是大肠埃希氏杆菌，E.coli，因为大肠杆菌在食品检测中指的是一类菌，它本身不是一个分类学名称。

4、细胞质是细菌的内环境，是蛋白质、各种酶类和核酸生物合成的场所，也是吸收营养物质后进行物质合成和分解代谢的场所。大肠杆菌的细胞质中含有糖原颗粒、核糖体和质粒等结构。

5、质粒是存在于基因组之外的遗传因子，不是大肠杆菌的基因组，在大肠杆菌中存在的质粒可以有多种、多个，是基因工程的主要载体。

6、对，质粒天然存在于细菌和真菌细胞中，有时候一个细胞里面可以同时有一种乃至于数种的质粒同时存在。但是载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。

大肠杆菌中的质粒能表达吗

大肠杆菌常被用作重组蛋白表达的宿主细胞，其表达流程原理如下：选择合适的表达载体：通常选择含有启动子、转录终止子、选择标记和适当的表达调控元件的表达载体。这些元件能够控制目标基因的转录和翻译过程。

当质粒与这些大肠杆菌混合后，质粒粘附在大肠杆菌的表面，在42℃的温度时，大肠杆菌出现热休克，质粒可通过大肠杆菌细胞膜上形成的空隙进入菌体内。

胰岛素基因确实表达了，但胰岛素是胞外蛋白需要高尔基体内质网加工，基因工程整合的受体最低也要达到真核细胞这个结构例如真菌类的酵母或某些哺乳类动物细胞，故大肠杆菌作为原核生物，无此条件不能产生胰岛素蛋白。

载体是指把一个有用的外源基因通过基因工程手段，送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。将某种目标基因片段重组到质粒中，构成重组基因或重组体。

【答案】：要使动物中编码激素的基因在大肠杆菌中表达，通常遇到的问题有：(1)必须利用原核细胞的表达调控原件。如细菌的RNA聚合酶不能识别真核生物的启动子。

大肠杆菌的质粒与酵母菌的质粒

大肠杆菌质粒DNA是与组蛋白2a、2b、5形成的八聚体结合。质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，是细胞染色体外能够自主***的很小的环状DNA分子。

所以，质粒中具有的元素有：C、H、O、N、P。

现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌）、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体(Vector)。

什么是大肠杆菌质粒载体?

1、胰岛素就可以通过使用载体将已插入胰岛素基因片段的质粒放入大肠杆菌内。经过插入基因片段的质粒就称作载体。该质粒在细菌内可以进行自我***，并且不会影响到生物原来的活动。

2、质粒（plasmid）是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体（或拟核）以外的DNA分子，存在于细胞质中，具有自主***能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子。

3、因为大肠杆菌的遗传背景清楚、各项优势明显。 像最常用的大肠杆菌质粒是pBR322质粒，因为其***是松弛型（质粒能大量的***），具有四环素和氨青霉素抗性基因标记（便于筛选），并具有一些便于应用的限制性核酸内切酶位点。

4、主要有以下三种：（1）附加体质粒（episomal：plasmid）：该质粒载体含有来自细菌质粒pBR322的***起点并携带作为大肠杆菌选择标记的氨苄青霉素抗性基因（emphasis：role=italicAmpsuperscriptrsuperscriptemphasis）。

5、质粒是基因工程中最常用的载体。质粒广泛存在于生物细胞中，是一种非必需的细胞器。从分子组成看，有DNA 质粒，也有RNA 质粒；从分子构型看，有线型质粒、也有环状质粒；其表型也多种多样。

6、载体的主要用途是将目的基因带入受体细胞且对受体细胞的生存不会产生太大影响。大肠杆菌里本来就有质粒，换句话说，质粒可以从大肠杆菌里提取出来；而用噬菌体的宿主细胞就是大肠杆菌。