基因敲除细胞-基因敲除细胞系定义

摘要： 本文目录一览：1、什么是基因敲除?2、基因敲除实现造血干细胞稳定重建...

本文目录一览：

• 1、什么是基因敲除?
• 2、基因敲除实现造血干细胞稳定重建
• 3、敲除基因的方法

什么是基因敲除?

1、参与修复的蛋白经常会在DNA末端插入或删除几个碱基，修复后的基因由于产生突变而导致功能丧失，从而实现机体内的基因敲除。最后再来看看如何应用 应用：基因敲除细胞系建立、基因敲除建立动物疾病模型。

2、基因敲除 是 基因打靶技术 的一种，类似于基因的 同源重组 。指 外源DNA 与 受体细胞 基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组，从而代替受体细胞基因组中的相同、相似的 基因序列 ，整合入受体细胞的基因组中。

3、基因敲除是基因打靶技术的一种，类似于基因的同源重组。指外源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组，从而代替受体细胞基因组中的相同/相似的基因序列，整合入受体细胞的基因组中。

4、基因敲除：又称基因打靶，该技术通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组，进行精确的定点修饰和基因改造，具有专一性强、染色体DNA可与目的片段共同稳定遗传等特点。

基因敲除实现造血干细胞稳定重建

1、在体外使用crispr技术后，他们将正常临牀供体造血干细胞中的ccr5基因敲除。在造血干细胞移植科胡良甲教授的共同努力下，他们实现了临牀供体造血干细胞ccr5基因的敲除。从基因编辑供体获得的cd34+成人造血干细胞成功移植到患者体内。

2、年，一名同时患有白血病和艾滋病的“柏林病人”在接受具有CCR5-Δ32突变的造血干细胞移植后，血清中的HIV病毒得到有效清除，实现了艾滋病的“功能性治愈”。

3、近日，《科学转化医学》（Science Translational Medicine）发表了一项重要发现，目前已经在跟相关厂商商讨商业发展，有望大幅提高造血干细胞移植的成功率和安全性。

敲除基因的方法

1、是指在基因序列里插入两个flox位点，当与cre小鼠杂交后激活flox位点从而敲掉两个flox之间的那一段基因。

2、基因敲除（knockout）是指通过一定的技术方法使机体特定的基因失活或者缺失的技术。针对某个序列已知但功能未知的序列，改变生物的遗传基因，令特定的基因功能丧失作用，从而使部分功能被屏蔽，并可进一步对生物体造成影响。

3、广义的基因敲除包括某个或某些基因的完全敲除、部分敲除、基因调控序列的敲除以及成段基因组序列的敲除。常用同源重组的方法。敲除的基因用以观察生物或细胞的表型变化，是研究基因功能的重要手段。

4、传统细菌基因敲除基于细菌中广泛存在RecBCD系统，外源DN段（主要是***质粒）通过电转化或接合方式进入受体菌与基因组同源片段进行重组，实现基因的插入突变与缺失突变。

5、基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点，以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。它克服了随机整合的盲目性和偶然性，是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。

6、基因敲除小鼠的原理是利用胚胎对基因进行改造，其方法就是胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养。